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CRISPR sgRNA文库定制化

研究基因在代谢通路或某些特定疾病发生过程中的功能,对于疾病机理研究及药物研发具有非常重要的意义。新一代基因编辑技术CRISPR以其操作简单和通用的独特优势,成为开展正向遗传学筛选实验强有力的工具。利用CRISPR技术建立可能与某类功能相关的突变体库,通过功能性筛选和富集、PCR扩增及深度测序分析,确认与这类功能相关的基因。

豪利777生物利用独创的“GPS”(Genotype,Phenotype,Synotype)平台,提供基于CRISPR sgRNA文库的一站式基因功能筛选服务。我们专利的Syno®合成技术平台,可以快速高效地实现sgRNA文库构建,并包装成慢病毒混合文库后转染细胞。结合高通量/高内涵筛选平台,利用控制细胞存活、结合免疫染色、流式细胞术等手段筛选得到所需细胞,最终通过测序等方法推断出发挥作用的靶基因。

服务优势
  • 针对客户需求的模式物种进行sgRNA设计
    针对客户需求的模式物种进行sgRNA设计
  • 自由选择sgRNA表达载体,提供转染级质粒
    自由选择sgRNA表达载体,提供转染级质粒
  • 提供从sgRNA设计、文库构建到慢病毒包装的一站式服务
    提供从sgRNA设计、文库构建到慢病毒包装的一站式服务
服务详情
服务项目 服务详情 周期
sgRNA设计 针对特定基因分类进行gRNA序列设计
每个基因设计3-6条sgRNA
1-2周
芯片合成 将所设计的所有sgRNA及阴性对照合成在一张芯片上 3-4周
sgRNA文库构建 将sgRNA构建到客户的目标载体上 2-3周
文库质粒大抽 根据发货量进行转染级质粒抽提 1周
文库质检及NGS验证(可选)

1. 克隆覆盖倍数必须大于100倍
2. 克隆正确率大于70%
3. NGS验证的文库正确率大于99%
4. NGS验证文库的均一性指标小于10

2-3周
病毒包装(可选) 慢病毒包装,病毒滴度: 108TU/ml 2-3周
总计   11-16周
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